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CCK-8細(xì)胞增殖和凋亡檢測(cè)試劑

簡(jiǎn)要描述:

CCK-8細(xì)胞增殖和凋亡檢測(cè)試劑公司正在出售的產(chǎn)品:β-tc-6小鼠胰島瘤胰島β細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄因子Gli3封閉多肽  馬冠狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒 大鼠血管緊張Ⅱ轉(zhuǎn)化(ACEⅡ)ELISA Kit 脫氫(DHA)活性比色法檢測(cè)試劑盒 菌屬 B淋巴細(xì)胞白血病前體蛋白轉(zhuǎn)錄因子2抗體

更新時(shí)間:2024-01-14

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CCK-8細(xì)胞增殖和凋亡檢測(cè)試劑

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

A-PJ1174

CCK-8細(xì)胞增殖和凋亡檢測(cè)試劑

100T

A-PJ1174

CCK-8細(xì)胞增殖和凋亡檢測(cè)試劑

500T

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PCR 反應(yīng)需要使用哪些試劑和設(shè)備?

試劑:
模板DNA:PCR反應(yīng)需要模板DNA,如從細(xì)胞、組織、血液中提取DNA等;引物:PCR反應(yīng)的兩個(gè)引物,分別與模板DNA的兩端配對(duì)擴(kuò)增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;dNTPs:PCR反應(yīng)中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細(xì)胞分裂、DNA合成等生物學(xué)過程,用于PCR擴(kuò)增的模板DNA鏈的延伸和擴(kuò)增;Taq DNA聚合酶:PCR反應(yīng)需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴(kuò)增DNA鏈;PCR buffer溶液:對(duì)PCR反應(yīng)具有緩沖作用,調(diào)節(jié)反應(yīng)pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機(jī)化合物如甲醛,可增強(qiáng)PCR反應(yīng)特異性,從而提高反應(yīng)效率;酶切體系:PCR擴(kuò)增往往涉及到重組、構(gòu)建和測(cè)序等等實(shí)驗(yàn)步驟,常常需要進(jìn)行酶切操作。MARK:一種分子量標(biāo)準(zhǔn),用來判別DNA片段大小的工具。DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物;
設(shè)備:
PCR儀:用于控制反應(yīng)溫度,保證PCR反應(yīng)時(shí)不同溫度環(huán)節(jié)的嚴(yán)格控制;電泳槽:用于分離PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;核酸提取儀:從組織樣本中全自動(dòng)提取核酸。  這些試劑和設(shè)備在PCR分子生物學(xué)技術(shù)中均是,只有在有序齊全的基礎(chǔ)上,才能進(jìn)行PCR反應(yīng)并得出準(zhǔn)確結(jié)果。

PCR相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn):

PCR反應(yīng)基本步驟一般的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)由20到35個(gè)循環(huán)組成,每個(gè)循環(huán)包括以下3個(gè)步驟:

一、變性:

利用高溫(93-98℃)使雙鏈DNA分離。高溫將連接兩條DNA鏈的氫鍵打斷。在第一個(gè)循環(huán)之前,通常加熱長一些時(shí)間以確保模板和引物分離,僅以單鏈形式存在。該步驟時(shí)間1-2分鐘,接下來PCR儀就控制溫度進(jìn)入循環(huán)階段。

二、退火或稱接合,復(fù)性:

在DNA雙鏈分離后,降低溫度使得引物可以結(jié)合于單鏈DNA上。此階段的溫度通常低于引物熔點(diǎn)5℃。錯(cuò)誤的退火溫度可能導(dǎo)致引物不與模板結(jié)合或者錯(cuò)誤地結(jié)合。該步驟時(shí)間1-2分鐘。

三、延伸:

DNA聚合酶由降溫時(shí)結(jié)合上的引物開始沿著DNA鏈合成互補(bǔ)鏈。此階段的溫度依賴于DNA聚合酶。該步驟時(shí)間依賴于聚合酶以及需要合成的DNA片段長度。傳統(tǒng)的Taq估計(jì)合成1000bp/min、較新的Tbr(來自于嗜熱菌Thermus brockianus)約40秒、商業(yè)公司生產(chǎn)的融合型聚合酶僅需約10-15秒。

PCR反應(yīng)條件優(yōu)化:

1、變性溫度和時(shí)間:

保證模板DNA解鏈?zhǔn)潜WC整個(gè)PCR擴(kuò)增成功的關(guān)鍵。加熱90~95°C, 30~60s,再復(fù)雜的DNA 分子也可變性為單鏈。溫度過高或高溫持續(xù)時(shí)間過長,可對(duì)Taq酶活性和dNTP分子造成損害。

2、復(fù)性溫度和時(shí)間:

PCR擴(kuò)增特異性取決于復(fù)性過程中引物與模板的結(jié)合。復(fù)性溫度越高,產(chǎn)物特異性越高。復(fù)性溫度越低,產(chǎn)物特異性越低。需根據(jù)引物的Tm值具體設(shè)定。

3、延伸溫度和時(shí)間:

一般位于Taq酶最適作用溫度70~75°C之間。引物小于16個(gè)核苷酸時(shí),過高的延伸溫度不利于引物與模板的結(jié)合,可以緩慢升溫到70~75°C。延伸反應(yīng)時(shí)間,可根據(jù)待擴(kuò)增片段的長度而定,小于1kb, 1min足夠;大于1kb需加長延伸時(shí)間。Taq酶可根據(jù)1kb/min增加時(shí)間。這里需要注意,延伸時(shí)間過長可能出現(xiàn)非特異擴(kuò)增。因此需要設(shè)置恰到好處的延伸時(shí)間。

4、循環(huán)數(shù):

其他參數(shù)選定后,PCR循環(huán)次數(shù)主要取決于模板DNA的濃度。理論上說20?25次循環(huán)后,PCR產(chǎn)物的積累即可達(dá)到最大值,實(shí)際操作中由于每步反應(yīng)的產(chǎn)率不可能達(dá)到100%,因此不管模板濃度是多少,20~30次是比較合理的循環(huán)次數(shù)。循環(huán)次數(shù)越多,非特異擴(kuò)增增加。

公司正在出售的產(chǎn)品:

馬皰疹病毒1型染料法熒光定量PCR試劑盒

Stathmin 1ELISA試劑盒 STMN1免費(fèi)代測(cè)試劑

人腺病毒D44型探針法熒光定量PCR試劑盒

腸球菌通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格

動(dòng)力蛋白胞漿1重鏈1ELISA試劑盒 DYNC1H1免費(fèi)代測(cè)試劑

痢疾桿菌PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

豬藍(lán)耳病病毒通用型/高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV-U/PRRSV-M)核檢測(cè)試劑盒

防御β112ELISA試劑盒

魯氏耶爾森菌PCR檢測(cè)試劑盒

牛流行熱病毒PCR檢測(cè)試劑盒

端粒重復(fù)序列結(jié)合因子1ELISA試劑盒

輪狀病毒C群染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

綿羊腺病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

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貓免疫缺陷病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

牛乳頭瘤病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

泛核蛋白2ELISA試劑盒

心病毒(SAFV)核檢測(cè)試劑盒

牛腎盂腎炎棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

芳乙酰胺去乙?;?/span>ELISA試劑盒

青果探針法PCR鑒定試劑盒

綿羊夏伯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

防御β136ELISA試劑盒

口蹄疫病毒3亞型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格

綿羊皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒

分揀連接蛋白19ELISA試劑盒

羌活染料法PCR鑒定試劑盒

牛皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒

鈣蛋白11ELISA試劑盒

流感嗜血桿菌型PCR檢測(cè)試劑盒

絡(luò)石藤染料法PCR鑒定試劑盒

人丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原(HCV core Ag)試劑盒ELISA

禽沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒

奈瑟菌通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格

小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)elisa試劑盒

亨德拉病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

紅斑丹毒絲菌(豬丹毒桿菌)染料法熒光定量PCR試劑盒

CCK-8細(xì)胞增殖和凋亡檢測(cè)試劑β-連環(huán)蛋白(CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286)ELISA檢測(cè)試劑盒

沙門氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒

滑液支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

人白介前體(pro-IL1B)試劑盒ELISA

博茲曼熒光桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

小反芻獸疫通用型/疫苗株/野毒株(PPR-U/ PPR-V/ PPR-W)三重核檢測(cè)試劑盒

人蛋白精氨脫亞氨4(PADI4)ELISA試劑盒

輕型鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒

 

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