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單克隆抗體(monoclonal antibody,Mab)技術(shù)是20世紀(jì)免疫學(xué)技術(shù)的一項(xiàng)里程碑式突破.該技術(shù)將免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合生成雜交瘤細(xì)胞,這種雜交瘤細(xì)胞核內(nèi)含有雙親細(xì)胞的染色體,繼承了親代細(xì)胞的特征.它既具有瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)中迅速增殖的能力.又具備免疫脾細(xì)胞合成和分泌特異性抗體的特性。隨后用適當(dāng)方法把雜交瘤細(xì)胞分離出來(lái),進(jìn)行單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng),使之大量繁殖,在培養(yǎng)液中形成單個(gè)雜交瘤細(xì)胞的克隆(也稱細(xì)胞系)。由于每個(gè)B淋巴細(xì)胞只有合成一種抗體的遺傳基因,所以單個(gè)雜交腐細(xì)胞的克隆也只能產(chǎn)生一種專一性抗體,即單克隆抗體。這種制備產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)被稱為單克隆抗體技術(shù)。
單克隆抗體是人工制備的雜交瘤細(xì)胞的,雜交瘤細(xì)胞是由一個(gè)經(jīng)抗原激活后的B細(xì)胞與一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞融合形成。其應(yīng)用領(lǐng)域,目前主要有三個(gè):
1.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑。
2.蛋白質(zhì)的提純。
3. 腫瘤的導(dǎo)向治療和放射免疫顯像技術(shù)。
優(yōu)點(diǎn):純度高,靈敏度高,特異性強(qiáng),交叉反應(yīng)少,制備的成本低。
缺點(diǎn):對(duì)技術(shù)有一定的要求,而且通過(guò)抗原的化學(xué)處理很容易丟失表位。
由雜交瘤單細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的單克隆抗體只能特異性地與抗原分子上的一個(gè)抗原決定簇結(jié)合,抗體成分均一,抗體的結(jié)構(gòu)、氨基酸順序、特異性等都是一致的,且在培養(yǎng)過(guò)程中只要不發(fā)生變異,不同時(shí)間內(nèi)分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)和功能。用這種技術(shù)可按需要大量很純的單一抗體,這些是用普通血清學(xué)方法所不能達(dá)到的。
單克隆抗體的發(fā)展經(jīng)歷了鼠源性單克隆抗體、嵌合性單克隆抗體、人源化單克隆抗體和全人源單克隆抗體四個(gè)階段。特別是全人源單克隆抗體,其可變區(qū)和恒定區(qū)都是人源的,這類抗體藥物具有高親和力、高特異性、幾乎沒(méi)有毒副作用等優(yōu)點(diǎn),克服了動(dòng)物源抗體及嵌合抗體的各種缺點(diǎn),成為治療性抗體藥物發(fā)展的必然趨勢(shì)。
單克隆抗體技術(shù)在臨床應(yīng)用中為疾病的診斷、治療提供了新手段,作為治療用藥物,單克隆抗體主要應(yīng)用于腫瘤、自身免疫疾病、qi官移植排斥及病毒感染等領(lǐng)域。單克隆抗體也可用于腫瘤的導(dǎo)向治療,將針對(duì)某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療或放療藥物連接,利用單克隆抗體的專一性識(shí)別結(jié)合特點(diǎn),將藥物攜帶至靶細(xì)胞并直接將其殺傷。由于單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、純度高、均一性好等優(yōu)點(diǎn),大大促進(jìn)了單克隆抗體檢測(cè)試劑盒的發(fā)展,在病原微生物、腫瘤、免疫細(xì)胞、激素及細(xì)胞因子的檢測(cè)診斷中廣泛應(yīng)用。若將放射性標(biāo)記物與單克隆抗體連接,注入患者體內(nèi)后可進(jìn)行放射免疫顯像,協(xié)助腫瘤的診斷。在親和色譜中單克隆抗體是重要的配體,若將單克隆抗體固定到一個(gè)惰性的固相基質(zhì)上,則可用于特異性抗原分子的高度純化。